以下文章来源于： 动脉新医药，作者：马宇洁
和铂医药今年的主动求变动作，每一步都备受关注，特别是其新确立的战略业务支柱之一全资子公司诺纳生物，两个月内便与Moderna、NK细胞领域的新星Dragonfly Therapeutics、ADC领域的国内龙头科伦博泰达成合作。同时也抛出问题：为什么全人源抗体动物平台如此被需要？
从抗体药物研发现状来分析，全人源抗体逐渐成为主流，且全人源抗体动物平台应用广泛。数据显示，直至2021年2月，在FDA批准的超100款抗体药物中，全人源抗体有39款，其中近70%通过转基因小鼠平台开发。
虽然全人源抗体动物平台的构建具有非常高的技术和资源壁垒，仅是小鼠平台的搭建平均就需要5-6年时间，但国内依然有和铂医药、金迈博、百奥赛图等一众实力雄厚的公司纷纷展开动作。
值得关注的是，就在上月，业内新星伊米诺康正式发布其单次MB级基因替换技术打造的全人源抗体小鼠平台，官宣10余天，已签订2个IND项目。据了解，该平台的构建仅用了18个月时间，获得了完整原位替换的人源免疫球蛋白可变区编码序列和顺式调控区的小鼠动物平台。
伊米诺康的创始人是周昌阳和张继伟两位博士。 周昌阳博士目前是中国科学院脑科学与智能技术卓越创新中心青年研究员，也是基因编辑与功能筛选研究组组长，专注于基因编辑工具开发和基因编辑治疗，曾在中科院神经所杨辉实验室进行研究工作。张继伟博士则曾在美国UT.MD安德森癌症中心进行博士后研究，长期专注于单体药物抗肿瘤药理研究。
全人源抗体动物平台研究现状如何？难点有哪些？未来的发展方向在哪？伊米诺康如何成为技术壁垒的突破者为了解这些话题，在新药创始人俱乐部主办的2023新春聚会上，动脉新医药采访了伊米诺康创始人&CEO张继伟博士。
小鼠平台搭建从5-6年缩短到18个月
动脉新医药：12月3日伊米诺康公开发布全人源抗体小鼠平台，到现在（12月16日）是否与一些企业进行了合作沟通？
张继伟： 对于Biotech、Biopharma和一些MNC，我们目前采用合作研发和平台授权这两种商业模式。2022年12月3日官宣，12月5日新药创始人俱乐部的公众号转发了我们文章，当时就有一些Biotech和Biopharma 跟我们沟通，目前已签订了2个IND项目，我们会进行进一步数据积累，做一些战略合作。
动脉新医药：市面上有多少家公司拥有全人源抗体小鼠平台？哪些平台应用最广泛？
张继伟： 目前市面上有10家类似公司，英国的 Kymab（现在被赛诺菲收购了）还有美国的再生元（Regeneron），从技术层面和药物发现有效性来讲这两家是全球公认的最好的平台。
动脉新医药：市面上已有的小鼠平台为什么平均需要5-6年才能搭建完成？
张继伟： 小鼠平台依赖BAC细菌人工染色体进行片段装载，每次搭载片段上限为300KB，而人体IgG基因总共有3.4M，因此只能一步一步进行替换，数十步的基因替换后在胚胎干细胞上进行操作，工作量很大，失败风险也很高。
上面提到的两个平台都采用这种方法。而每一步替换都需要在胚胎干细胞上操作，由于胚胎干细胞并不能经受多次的基因替换，因此替换过程中，胚胎干细胞要发育成小鼠，对小鼠受精卵再次建立胚胎干细胞系后，进行后续的基因替换步骤。整体需要十几步，每一步都需要至少半年的时间。如果中间有失败，也会再延长研发的时间。所以当时再生元搭建全人源小鼠平台时，哈佛医学院的一个教授带领了20个博士后，花了6年多时间完成了平台的搭建。
动脉新医药：伊米诺康为何能在18个月搭载完成？
张继伟： 伊米诺康依托原创的MASIRT®技术，使用线性人工染色体进行搭载，扩大了每次基因装载上限，减少了装载次数。通过MASIRT®技术每次替换只需要3-6个月时间，一次能搭载1MB-5MB大小的基因片段。 人体IgG基因分别存在于三条染色体上，分别是IgH、IgK和Igλ，大小分别是1M、 1.6M和0.8M。首先我们对三个小鼠分别依次进行原位替换。替换完之后，把这三个小鼠进行交配，交配完再进行筛选，拿到一个纯合子的全人源小鼠平台，总共花费18个月时间。同时由于我们在受精卵上进行操作，不需要依赖胚胎干细胞的全能性，所以可以在多个物种中实现超大片段的跨物种基因替换。
动脉新医药：在小鼠平台搭建过程中，是否也遇到过搭载效率低的问题？
张继伟： 我们首先进行了重链H链的原位替换，然后进行了轻链K链和λ链的替换。在早期重链的替换过程中，遇到了载体效率低的问题，因为替换片段很大，所以阳性率特别低，当时只有 1% ~2%。后来我们研发团队对技术不断进行打磨，在轻链替换时阳性率提高到了5%左右。这也为未来全人源抗体兔平台搭建积累了相关的经验，我们相信兔平台搭建会更顺利一点。
动脉新医药：这些年全人源抗体动物平台搭载效率问题解决了多少，技术稳定性怎么样？
张继伟： 1994年时，有科学家意识到把人的序列替换到小鼠身上，进行免疫之后产生人的序列，就不需要再把小鼠抗体进行人源化改造。但那时还没有现在的基因编辑技术，用传统转基因技术替换的片段很小，大约不到现在的 1/10，那时也能够筛到想要的抗体，几率会很低，工作量很大。随着生物技术不断发展，Kymab和Regeneron（再生元）大约在2006年开始搭建全人源抗体动物平台，在2012年前后搭建完成，基本上齐头并进。全人源抗体动物平台很快得到了行业的关注和认可，之后又有很多公司加入进来，搭载效率有了一些提升。不过大都还是基于转基因随机插入的技术，可以筛到一些抗体，但稳定性没有那么好。
动脉新医药：应用已有动物平台，伊米诺康计划如何开展平台验证？
张继伟： 早期我们注重平台验证，主要针对已经上市、即将上市的知名靶点进行平台验证，这样可以全方位多维度的进行头对头的数据比较，以期确定我们平台的优越性。初步的数据已经达到我们的预期，强有力地证实了我们全人源小鼠平台具有产生优质抗体的能力，为合作伙伴提供坚实的参考数据。
动脉新医药：投资人如何评估全人源抗体小鼠平台这个项目的价值？
张继伟： 首先伊米诺康的全人源抗体动物平台有完整IP。其次就是我们的技术可以在多个物种中实现超大片段的基因替换，而目前在全球范围内还没有完整原位替换的全人源兔的平台，通过伊米诺康的MASIRT®技术，可以很快开展其他动物平台的搭建。所以投资人不仅仅看好我们有小鼠平台，还有后续的我们有全人源兔和羊驼小鼠平台。虽然我们最近没有在融资，而且目前是资本寒冬，但主动找我们的投资人还是蛮多的。
动脉新医药：当下生物医药行业对药物质量有了更高的要求，在这一背景下，您如何评估全人源抗体动物平台的市场空间？
张继伟： 国内出台了一些相关政策，现在上市之前一定要和已经上市的药物进行头对头的比较，要比已上市药物好，新药才有上市的机会。在这个状况下，对于Biotech来说，不是说有me-too和me better的药物就可以融到资，而是要有头对头比较数据的。现在又是资本寒冬，管线推进又很烧钱，所以大家对于抗体序列的源头发现的选择更为严谨。
也就是说，现在从源头开始就要找到最优质的候选分子。以前做抗体药物，可以通过野生型小鼠进行免疫再进行人源化改造，这容易产生抗药抗体（ADA），是导致抗体药物功效受损的主要原因。因此，越来越多的管线开发企业希望能够在抗体药开发的早期发现阶段进行免疫原性风险评估，降低研发风险，全人源抗体动物平台是目前发现抗体最有优势的平台，后续的开发风险也相对更低。在国家在产业推动上更理性化、投资人对行业更为理性化的趋势下，会引发行业更多关注。
未来会是鼠、兔、羊驼等多平台联合服务
动脉新医药：您认为目前可以从哪些维度衡量一个小鼠平台的优劣性？
张继伟： 有三个关键的标准。第一，完整IgG基因序列的替换是提供更多样化氨基酸序列的基础。第二，原位替换是小鼠稳定遗传的重要条件。第三，小鼠是否具有可媲美野生型小鼠的免疫反应。 衡量一个小鼠平台的优劣性，最基本的是看是否能够完整地替换基因。目前市面上大部分平台的替换都是不完整的，替换越完整，能产生人源抗体多样性越好，这是很重要的一个衡量标准。
另外，看是否原位替换，原位替换能稳定遗传，但目前市面上平台大多还是随机插入策略，即把人类的序列随机插入到小鼠的染色体上，再把小鼠的基因敲除，这种方法的遗传稳定性较差。
小鼠的免疫反应也很重要，伊米诺康的ImmuMab mouse具有和野生型小鼠显示的免疫细胞特性，和媲美野生型小鼠的免疫反应能力，能够产生高血清效价的抗体，阳性抗体比例高，这更有助于开发后高质量的候选抗体分子。
动脉新医药：在小鼠平台之后，科研人员为什么会关注到兔平台和羊驼小鼠平台？
张继伟： 对于一些诊断性抗体，或者是CAR-NK，CAR-T这些序列，用全人源小鼠平台进行药物发现完全可以。但对于亲和力比较高，敏感度比较低的靶点来说，兔平台的应用就很重要。对于ADC、双抗药物，羊驼小鼠平台或者是共同轻链的平台是他们的需求点。
全人源抗体兔平台所具备的优势是小鼠所无法匹敌的，首先兔的脾脏是小鼠的10倍大，抗体多样性好很多。其次兔的抗体特异性很好，亲和力常数在10 -12左右，而小鼠只能达到10 -9。此外，兔有一个天然的优势——它的抗体既可以抗鼠，也可以抗人。因此在对通过兔平台发现的抗体序列进行后续药物验证时，特别是在小鼠身上进行药理验证时，就无需将小鼠进行靶点人源化替换，可以直接进行药理评估，后续的工作时长和工作强度都会有很大降低。
动脉新医药：搭建羊驼小鼠平台会遇到一些新的难题吗？
张继伟： 现在纳米抗体动物平台主要是羊驼，但成本很高，一只羊驼的费用在3万以上，每天的饲养费用大约在60-100元之间。而每次聚集免疫至少需要10毫克蛋白抗原，需求很大，成本是很大的难题。
动脉新医药：如何控制羊驼小鼠平台成本？搭建这个平台时间要多久？
张继伟： 伊米诺康在搭建的羊驼小鼠平台成本很可控。在早期搭建全人源小鼠平台时，重链替换花了很长的时间，在这个过程中积累了很多的经验，现在搭载效率比之前高很多。同时我们有合作方提供羊驼的细胞，把羊驼的H链装载到线性人工染色体上，进行大片段基因替换，就可以把小鼠抗体重链可变区序列替换成羊驼序列。所以对我们来说会很快，预计在2023年七八月份会拿到羊驼小鼠平台。如果研发成功，基本可以替代掉羊驼在纳米抗体研发过程中的角色，大大加速基于纳米抗体的药物研发进展。
动脉新医药：您认为之后全人源抗体动物平台的发展方向是怎样的？
张继伟： 未来可能会是多平台联合的趋势，包括全人源小鼠平台、羊驼小鼠平台、全人源抗体兔平台等等，对于不同用途的药物，需要不同的定制化的平台来发现。 伊米诺康除已开发完成全人源抗体小鼠平台外，现在也正在打造羊驼小鼠平台和全人源抗体兔平台。